發(fā)布日期:2024/09/04
一、根據(jù)用途不同,微生物培養(yǎng)基可以大致分為以下幾類:
1、基礎(chǔ)培養(yǎng)基:含有細(xì)菌基礎(chǔ)生長所需的基本營養(yǎng)成分,最常用的是肉浸液,俗稱肉湯,主要含生肉浸液和蛋白胨,用于細(xì)菌的增菌、檢驗,也是制備其他培養(yǎng)基的基礎(chǔ)成分。
2、營養(yǎng)培養(yǎng)基:基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入血液、 葡萄糖、生長因子等特殊成分,供營養(yǎng)要求高的細(xì)菌和需要特殊生長因子的細(xì)菌生長,最常用的是血瓊脂平板和巧克力血平板等。
3、鑒別培養(yǎng)基:在某些培養(yǎng)基中加入一些特定物質(zhì), 如糖、苷、醇類、氨基酸、蛋白質(zhì)等和指示劑,測定細(xì)菌的生化反應(yīng),以鑒別和鑒定細(xì)菌用的培養(yǎng)基。例如糖發(fā)酵管、克氏雙糖鐵瓊脂(KIA)、伊紅-亞甲藍瓊脂和動力-吲哚-尿素(MIU) 培養(yǎng)基等。
4、選擇培養(yǎng)基:在培養(yǎng)基中加入抑制劑,抑制標(biāo)本中雜菌生長,有助于所選擇的細(xì)菌種類的生長。如培養(yǎng)腸道致病菌的沙門-志賀瓊脂。
5、特殊培養(yǎng)基:某些細(xì)菌在生長繁殖時需要特殊的條件才能夠生長,包括厭氧培養(yǎng)基和細(xì)菌L型培養(yǎng)基等。前者是培養(yǎng)專性厭氧菌的培養(yǎng)基,后者是針對細(xì)胞壁缺損的細(xì)菌L型。
二、微生物培養(yǎng)基的組成成分主要包括以下幾類:
(1)營養(yǎng)物質(zhì)
不同的細(xì)菌對營養(yǎng)的要求不同,但細(xì)菌需要的營養(yǎng)物質(zhì)應(yīng)含有氨源、碳源、無機鹽類和生長因子等。
1、碳源:最常用的碳源是葡萄糖,它提供能量和碳元素用于細(xì)胞的代謝和生長。除了葡萄糖,還可以使用其他碳源,如乳糖、果糖等。
2、氮源:氮源是細(xì)胞合成蛋白質(zhì)和核酸所必需的。常見的氮源包括氨基酸、蛋白胨、酵母提取物、尿素等。
3、礦物質(zhì)和無機鹽:提供細(xì)菌生長的各種元素,如鉀、鈉、鐵、鎂、鈣、磷、硫等。最常用的有氯化鈉和磷酸鹽,前者維持酶的活性、調(diào)節(jié)菌體內(nèi)外的滲透壓,后者是細(xì)菌良好的磷源,并具有緩沖作用。
4、維生素:維生素是細(xì)胞合成酶的輔因子,對細(xì)胞生長和代謝過程至關(guān)重要。常見的維生素包括維生素B群、維生素C、維生素E等。
5、氨基酸:氨基酸是蛋白質(zhì)合成的組成單元,對于細(xì)胞的生長和功能非常重要。培養(yǎng)基中通常包含一部分或全部必需氨基酸,而非必需氨基酸通常不需要額外添加。
6、生長因子和激素:生長因子和激素可以促進細(xì)胞的增殖和分化。不同類型的細(xì)胞需要特定的生長因子和激素來實現(xiàn)最佳生長條件。
(2)凝固物質(zhì)
制備固體培養(yǎng)基時,需在液體中加入凝固物質(zhì)。常用凝固物質(zhì)為瓊脂,某些情況下也可用明膠、卵白蛋白、血清等。瓊脂是從石花菜中提取出來的一種半乳糖膠,溫度在98℃以上時可溶于水,在45℃以下可凝固成凝膠狀態(tài),不被細(xì)菌分解利用,無營養(yǎng)作用。
(3)抑制劑和指示劑
制備培養(yǎng)基時常加入抑制劑和指示劑,不是細(xì)菌生長繁殖所必需的物質(zhì),而是選擇、鑒定及判斷結(jié)果的需要。
1、抑制劑:具有選擇抑制作用,在制備培養(yǎng)基 時加入定種類的抑制劑, 可抑制非檢出菌(非病原菌)的生長,利于檢出菌(病原菌)的生長,常用有膽鹽,煌綠、亞硫酸鈉、亞硒酸鈉及-些染料和某些抗生素等。
2、指示劑:在培養(yǎng)基中加入一定種類的指示劑, 觀察細(xì)菌是否利用和分解培養(yǎng)基中的糖、醇類。常用的有粉紅、甲基紅、中性紅、溴甲酚紫、溴麝香草酚藍和中國藍等酸堿指示劑。亞甲藍常用作氧化還原指示劑。
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